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格羅貝爾舉辦深圳先進院神經元成像小鼠手術培訓

[db:作者] - 2020-08-24

應中國科學院深圳先進技術研究院腦認知與腦疾病研究所(以下簡稱“深圳先進院”)邀請,格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,為深圳先進院圓滿舉辦了一場由格羅貝爾引進中國并始終為中國代理的inscopix nVoke2.0在體自由動物神經元成像應用的技術培訓。

當日,深圳先進院20余名科研人員參加了這次inscopix nVoke2.0的小鼠手術培訓。格羅貝爾生物科技公司技術人員帶領大家一道順利完成手術全過程。
 
我們對手術過程做以下記錄,供神經科研人員參考:
  1. 實驗前準備好所有的手術器械。
  2. 小鼠麻醉后,將小鼠的頭部固定在腦定位儀上,打開頭頂皮膚,將頭骨上面清理干凈,露出清晰骨縫,找到Bregma,Lambda點,將前后水平調好后,在Lambda和Bregma連線的中間位置,往左右兩邊取相同距離,進行左右水平的調整。
  3. 根據算出來的目標組織位點,在目標位置在頭骨上的投影點處鉆一小孔,將準備好的病毒液體注射入目標位點,創口消毒消炎處理,縫合皮膚。
  4. 2~4周以后,在之前打病毒的位置,用同樣方法定位出目標位點。
  5. 根據打算植入的透鏡粗細判斷要鉆孔的大小,骨孔直徑比透鏡直徑粗0.3~0.4mm即可,在目標點位四周相應位置處標出鉆孔邊緣位置,用電鉆鉆骨孔。一般要觀察的目標位點要比透鏡底端低約200微米即可,如果要觀察的是較淺皮層位置,可以直接埋植透鏡,如果要觀察的是較深的腦區,則需要將埋植位點以上300~400微米以外的柱形腦組織區域全部除去。
  6. 可以用相應粗細的平頭注射針頭連接上真空泵,用適宜壓力吸除組織,吸除過程中不斷在腦組織上方灌注生理鹽水進行抽吸以去除血液,吸到目標位置上方約300~400微米即可,孔洞直徑參考要埋植的透鏡粗細,直到血液不再流出可停止灌流。
  7. 在距離鉆孔約5mm處鉆2~3個淺孔,擰入2~3枚骨螺絲釘。
  8. 將透鏡與微型顯微鏡連接到夾持桿,并固定在定位儀上。
  9. 打開數據采集軟件,打開顯微鏡激發光,實時觀察畫面,將透鏡慢慢深入動物腦內,關閉小鼠周圍的強光,此時采集軟件上大部分為黑色,待透鏡接近目標病毒表達位置時,病毒的綠色熒光會使得畫面較明顯的變亮,根據畫面中模糊能看出血管的影像或采集軟件中光強的histogram峰值在7000左右,可以在此位置埋植透鏡。
  10. 用牙科水泥將骨螺釘和透鏡上的黑色膠圈粘合在小鼠頭骨上。
  11. 待牙科水泥完全干燥堅硬后,將透鏡夾持器小心取下。用黃藍遮蓋硅膠混合為完全綠色,涂在透鏡上端。
  12. 待小鼠恢復,需單籠飼養,防止被啃咬透鏡。
 
多年來,格羅貝爾生物科技公司Global Biotech Inc,與深圳先進院保持良好的技術交流和合作,并每年作為金牌贊助商參加深圳先進院舉辦的各類腦科學會議和培訓班,為中國腦科學發展做出力所能及的貢獻。

特別聲明:

近期,有公司和個體不斷擾亂Inscopix中國市場,希望中國科研人員向Inscopix一進入中國市場就選擇并始終為中國代理----格羅貝爾生物科技公司(美國Global Bietech Inc,)詳細咨詢、核實,辨別其他推銷公司的規模、特別是技術團隊能力,以免受損。
 
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