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CRISPR是繼RNA干擾技術、高通量測序技術等之后生物科學發展歷史上最具顛覆性技術之一，使用高效、迅速且簡單，在生物醫學研究領域及臨床實踐中引起一場巨變。經過近幾年的發展，CRISPR不僅成為了生物醫學研究實驗室的常規研究技術，也已經成功用于臨床治療和診斷，例如近期發表的啟動于2016年的全世界第一個CRISPR基因編輯T細胞治療腫瘤的臨床實驗證明安全可靠；此外，基于 CRISPR的快速診斷技術在最近爆發的冠狀病毒流感快速檢測中大放異彩。CRISPR技術正被越來越多的研究人員用來改造人類基因以消除疾病，創造生命力更加頑強的植物，消滅病原體等。在過去的7年中CRISPR技術斬獲了生命科學領域各種重量級獎項，包括生命科學突破獎，蓋爾德納國際獎等，《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR單堿基基因編輯技術的突破，2019年9月，北京大學鄧宏魁組完成世界首例基因編輯治療艾滋病和白血病，使CRISPR技術再一次成為生命科學的焦點。

CRISPR技術不僅能夠在不同物種中對特定的基因進行敲除，敲入等，經過改造后還能在轉錄水平調控基因的表達或者沉默、對特定的基因進行原位標記、在細胞水平或體內對單堿基進行編輯（BE2，BE3，ABE等）、體外系統中用于病原微生物或者基因突變的檢測等（Sherlock、DETECTR）；此外，通過與慢病毒或AAV技術聯合可以輕松在全基因組水平進行基因快速篩選，David Liu研究小組與2019年實現了無模板的基因敲入技術。

隨著研究的深入，CRISPR/Cas9系統的應用更加便捷、高效，也更廣泛，目前該技術成功應用于人類細胞、斑馬魚、小鼠以及細菌等基因組精確修飾，成為科研人員的強大工具，基于CRISPR臨床實驗已經取得初步成功。

為了讓更多的科研人員及時全面的掌握CRISPR最新技術，并應用的相應的領域研究中，結合近期新冠肺炎疫情影響，減少旅行或者接觸帶來的不必要風險，微旋基因將于近期舉辦CRISPR/Cas9基因編輯在線培訓+云實驗學習班。其中理論部分采用在線授課模式，在兩天的時間內帶領大家詳細了解基因編輯的發展歷史，技術原理，應用案例（基因敲除、敲入、單堿基基因編輯、轉錄激活/沉默、全基因組篩選、基因檢測、基因標記、無模板基因敲入等），并在線針對基因編輯不同應用方向進行實戰演練。云實驗為可選部分在理論課程結束后采用同步直播方式進行，確定參加云直播后會提前快遞寄送所需要的實驗材料，實驗儀器自備，課程當天同步進行實驗。
 

日期	時間	培訓內容	授課老師
第一天	9:00-11:30	理論講解： 一、基因編輯技術簡介（三代基因編輯工具） 1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR 二、CRISPR/Cas9基因編輯技術原理 1. CRISPR/Cas9發現歷史 2. CRISPR/Cas9作用機制解析 3. CRISPR/Cas9系統改造策略	劉剛博士 2008年博士畢業于中國科學院上海生命科學研究院，從事腫瘤干細胞，細胞衰老，腫瘤轉移等細胞作用網絡和通路的研究，并作為骨干研究人員參加了973計劃項目、國家自然科學基金重點項目、在香港中文大學做為作為Postdoc和Research fellow，從事研究工作。先后Nature Genetics，cell research、PLOS one等期刊發表論文十余篇。
	13:00-17:00	理論講解： 一、sgRNA在線設計構建實戰演練(1.靶基因序列查找2.sgRNA在線設計合成) 二、CRISPR/Cas9轉染策略: 1.生物轉染（慢病毒、腺相關病毒等） 2.物理轉染 （電轉核酸/RNP、顯微注射、基因槍） 3.化學轉染 （脂質體、陽離子聚合物） 三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率檢測，脫靶檢測及解決策略 1、高保真Cas9（espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9）
第二天	9:00-11:30	理論講解： 一、CRISPR技術應用解析 1.基因敲除（單基因敲除、多基因敲除、大片段刪除、多靶點sgRNA載體構建策略） 2.基因敲入實戰演練（gRNA選擇、同源臂設計、導入，長片段導入策略/提高基因敲入效率策略，PITCh、HITI、CRISPR-轉座酶高效基因敲入系統） 3.CRISPR在轉錄調控中的應用（轉錄激活、轉錄抑制系統） 4.CRISPR靶基因標記定位 二、CRISPR案例解析 1.基因敲除在小鼠模型構建、植物、細胞、細菌、真菌等中的應用案例解析 2.基于CRISPR的全基因組基因敲除高通量篩選策略（文庫構建，選擇，流程優化等） 3.基于CRISPR的全基因組轉錄激活/抑制高通量篩選策略（文庫構建，選擇，流程優化等） 三、CRISPR/Cas9與基因沉默技術（siRNA、shRNA）系統比較。
	13:00-17:00	理論講解： 一、單堿基基因編輯技術簡介及在基因治療中的應用 1.HF2-BE2 2.BE3系統 3.ABE系統4.單堿基基因編輯脫靶克服。 二、基因CRISPR的基因檢測系統 1、CRISPR-Cas12a系統介紹(DETECTR) 2、CRISPR-Cas13a系統介紹(SHERLOCK-多重病原菌檢測) 三、CRISPR/Cas9系統在腫瘤和遺傳病治療中應用解析 1、CRISPR結合免疫檢查點抑制劑治療腫瘤 2、單基因遺傳病治療（DMD、先天性黑朦、地中海貧血等） 3、CRISPR治療HIV-基因編輯嬰兒解析 4、CRISPR治療HIV炎性白血病病例解析 四、新一代無模板基因敲入系統解析 1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及應用

 

實驗內容	培訓內容
sgRNA敲除載體構建	1.靶基因序列查找
	2.sgRNA在線設計合成
	3.敲除載體選擇及線性化
	4. sgRNA連接，轉化等
敲除載體轉染及初步鑒定	1.敲除質粒轉染
	2.轉染篩選及敲除效果鑒定
	3.單克隆鑒定

課程福利

所有參加培訓的老師均可獲得：

1. 免費贈送基因編輯質粒載體一份：可以用于哺乳動物、植物、真菌、細菌、斑馬魚、線蟲等，共62種。

2. 免費贈送sgRNA離線設計軟件（有基因組DNA序列即可設計！）。

3. 分子生物學免費軟件安裝包一套（snapgene，premier6，Graphpad6.01，億圖圖示專家-技術路線圖繪制，Endnote，Flowjo等）。

4. 免費獲得價值99美元信號通路圖制作神器 Biomedical-PPT-Toolkit-Suite一套。

舉辦地點
騰訊會議

參加對象
從事醫學、生命科學、農學等領域科研工作者和高校教師及研究生。

授課方式
理論講授和實際演練緊密結合。

收費標準
注冊費：理論授課 3500元/人，2020年5月20號之前匯款報名可以優惠至：3300元/人。實驗操作課程需加800元/人，同一個單位三個人以上報名可以免費構建價值1500元的質粒一個。

銀行匯款
北京微旋基因技術有限公司
開戶行：中國建設銀行北京宣武支行
賬  號：11001019500053058529
備  注：銀行轉賬的學員，請于匯款單備注欄內注明參會人姓名

聯系人
鄭老師    010-53516075       sales@micro-helix.com

承辦單位：                               
北京微旋基因技術有限公司