022150 品紅亞硫酸鈉培養基(遠藤瓊脂培養基)

　　(Endo Agar)

　　用 途：

　　品紅亞硫酸鈉培養基(遠藤瓊脂培養基)用于水中大腸菌群的分離或確證試驗。 (GB/T8538-2008和GB5750.12—2006)。

　　原 理：

　　乳糖發酵的細菌產生乙醛，在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結合形成紅色菌落，快速發酵乳糖的細菌產生金屬光澤，不發酵乳糖的細菌形成無色透明的菌落。

　　蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、維生素和礦物質;乳糖為可發酵的糖類;瓊脂是培養基的凝固劑;磷酸氫二鉀為緩沖劑;亞硫酸鈉能將堿性品紅還原，使其褪色，發酵乳糖的細菌產生乙醛，與亞硫酸鈉和堿性品紅生成紅色菌落。

　　配方(每升)：

　　蛋白胨 10g

　　酵母膏粉 5g

　　牛肉膏粉 5g

　　乳糖 10g

　　瓊脂 15g

　　磷酸氫二鉀 3.5g

　　無水亞硫酸鈉 5g

　　堿性品紅 1g

　　最終pH 7.2±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取品紅亞硫酸鈉培養基(遠藤瓊脂培養基)54.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，115℃高壓滅菌20min，冷至50℃左右，傾注無菌平皿，備用。

　　2、濾膜滅菌：將孔徑為0.45μm的濾膜放入燒杯中，加入蒸餾水或去離子水，置于沸水浴中煮沸滅菌三次，每次15min。前兩次煮沸后需更換水洗滌2—3次，以除去殘留溶劑。

　　3、濾器滅菌：用點燃的酒精棉球，火焰滅菌。也可用121℃高壓滅菌20min。

　　4、過濾水樣：用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分，將粗糙面向上，貼放在已滅菌的濾床上，固定好濾器，將100mL水樣(如水樣含菌較多，可減少過濾水樣量，或將水樣稀釋)注入濾器中，打開濾器閥門，負0.5大氣壓下抽濾。

　　5、培養：水樣抽濾完后，再抽氣約5S，關上濾器閥門，取下濾器，用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分，移放在品紅亞硫酸鈉培養基上，濾膜截留面向上，濾膜應與培養基完全貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將平皿倒置，放入36±1℃恒溫箱內培養22—24h。

　　6、觀察結果：挑出符合下列特征菌落進行革蘭氏染色、鏡檢。

　　紫紅色，具有金屬光澤的菌落。

　　深紅色，不帶或略帶金屬光澤的菌落。

　　淡紅色，中心色較深的菌落。

　　質量控制：

　　本培養基傾注平皿待冷卻后呈淺紅色。質控菌株接種后。36±1℃培養22—24h， 觀察結果如下表：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規 格：250g

　　參考文獻:

　　1. GB/T 8538-2008 中華人民共和國國家標準 飲用天然礦泉水檢驗標準

　　GB5750.12-2006 中華人民共和國國家標準 生活飲用水檢驗方