沙門氏菌顯色培養(yǎng)基

　　(Chromogenic Salmonella Agar )

　　用　　途：

　　用于沙門氏菌的快速分離和鑒定。(GB4789.40-2010)

　　原 理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;膽鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;選擇性添加劑增強(qiáng)培養(yǎng)基的抑制雜菌的能力;混合色素分別與沙門氏菌和大腸菌群所對(duì)應(yīng)的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上沙門氏菌產(chǎn)生品紅色的菌落，大腸菌群產(chǎn)生藍(lán)綠色的菌落。

　　沙門氏菌顯色培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨 19.6g

　　酵母膏粉 3g

　　氯化鈉 5g

　　膽鹽 　　　　　1.5g

　　瓊脂 12g

　　混合色素 　　 6.4g

　　最終pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、稱取沙門氏菌顯色培養(yǎng)基47.5g，混合均勻加熱至100℃，并按常規(guī)不斷攪拌直至完全溶解(不能持續(xù)高溫加熱，建議不要重復(fù)煮溶)，不需高壓滅菌，冷至50℃，加入10支沙門氏菌選擇性添加劑(凍干粉每支需先用1ml無(wú)菌水溶解)，混勻，傾注滅菌平皿。

　　2、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液與增菌液。

　　3、建議使用二步增菌法：

　　(1)前增菌：將處理過(guò)的樣品25g置于225mL緩沖蛋白胨水中，混合均勻后37℃培養(yǎng)6～8h;

　　(2)選擇性增菌：取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)中，混合均勻后37℃培養(yǎng)18～24h;

　　4、用接種環(huán)取增菌液一環(huán)，劃線接種于沙門氏菌顯色平板上，置于36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。

　　5、觀察結(jié)果。挑取顯色平板上呈品紅色，扁平透明，邊緣光滑，直徑約2mm的可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)。

　　6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn)，對(duì)疑似沙門氏菌菌落進(jìn)行生化鑒定。

　　質(zhì)量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)18—24h生長(zhǎng)情況如下表:

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規(guī) 格：可配置1L的培養(yǎng)基干粉。

　　參考文獻(xiàn)：

　　1.GB/T4789.4-2008 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)

　　2.GB 4789.4-2010 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)