027382 改良CCD瓊脂

　　Modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar,mCCDA

　　用 途：

　　用于空腸彎曲菌的選擇性分離培養(yǎng)。(GB4789.9-2008，ISO標準)

　　原 理：

　　肉浸液、動物組織酶解物、酪蛋白酶解物提供碳、氮源、維生素、生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;木炭具有解毒、收集二氧化碳和改變表面張力的作用;去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑;頭孢哌酮可抑制普通腸道菌生長、兩性霉素B 抑制酵母和真菌生長、利福平可抑制非彎曲菌其他厭氧菌。硫酸亞鐵和丙酮酸鈉有利于空腸彎曲菌的生長;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

　　基礎(chǔ)配方(每升)：

　　肉浸液 10g

　　動物組織酶解物 10g

　　氯化鈉 5g

　　木炭 4g

　　酪蛋白酶解物 3g

　　去氧膽酸鈉 1g

　　硫酸亞鐵 0.25g

　　丙酮酸鈉 0.25g

　　瓊脂 12g

　　最終pH 7.2±0.2

　　配套試劑配方：(每100mL)

　　頭孢哌酮 0.0032g

　　兩性霉素B 0.001g

　　利福平 0.001g

　　使用方法:

　　1. 稱取改良CCD瓊脂45.5g，加入蒸餾水或去離子水1000mL攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。

　　2. 每支凍干配套試劑在無菌操作條件下加入1mL無菌水，45℃水浴加熱完全溶解。將滅菌培養(yǎng)基融化并冷卻至45℃左右，每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入1瓶配套試劑SR0320混合后傾注平板。

　　3. 用接種環(huán)挑取24h增菌液、48h增菌液及相應(yīng)的1：50稀釋液，劃線平板，在微需氧條件，42℃±1℃培養(yǎng)48±2h。

　　4. 觀察結(jié)果。

　　質(zhì)量控制：

　　下列質(zhì)控菌株接種后于42℃±1℃微需氧培養(yǎng)48±2h結(jié)果如下：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

　　規(guī) 格：250g

　　參考文獻：

　　1. GB/T 4789.9-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 空腸彎曲桿菌檢驗

　　2. 美國FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 7 Campylobacter

　　3. ISO10272-1995 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for detection of thermotolerant Campylobacter